In vitro cytotoksisk effekt av venom fra vestlig honningbie (Apis mellifera) hos glioblastoma cellelinjer av typen U251 og C6.
Master thesis
Permanent lenke
https://hdl.handle.net/1956/3231Utgivelsesdato
2008-06-01Metadata
Vis full innførselSamlinger
Sammendrag
Flere in vitro-metoder kan benyttes til å evaluere både generell og organspesifikk toksisitet. Disse metodene kan kombineres med bioprospektering for å screene mulige legemidler for cytotoksisk effekt, og samtidig begrense bruken av dyr til slike forsøk. In vitro-metoder kan dermed være både et supplement og et alternativ til bruk av forsøksdyr. I denne studien er det benyttet kontinuerlige cellelinjer fra krefttypen glioblastoma multiforme, som stammer fra hjerne, til å evaluere cytotoksisk effekt av helt bivenom (BV) fra vestlig honningbie (Apis mellifera). De to cellekulturene som ble benyttet, U251 og C6, var henholdsvis av humant opphav og hentet fra rotte. Det ble benyttet forskjellige metoder for å evaluere levedyktighet, vekstbegrensning, rekonvalens og induksjon av apoptose med tanke på en eventuell fremtidig bruk som legemiddel mot kreft. BV gir en betydelig begrensning av levedyktighet av både U251 og C6 allerede etter 24 timers eksponering. U251-cellene viste 70% levedyktige celler ved eksponering med 6 μg/ml BV i 24 timer, mens C6-cellene viste tilsvarende effekt ved 9 μg/ml, med 65,8% levedyktige celler. Tilsvarende effekt ble observert ved eksponering over lengre tid, der 6 μg/ml BV opprettholdt den veksthemmende effekten etter 72 timer hos U251, mens 9 μg/ml måtte til for å opprettholde veksthemmende effekt hos C6. Når eksponeringen ble fjernet etter 48 timer og cellene fikk vokse i friskt medium viste det seg at 6 μg/ml BV ikke ga en varig veksthemmende effekt hos noen av celletypene. C6 viste også her høyest grad av toleranse, der de første 24 timene etter fjerning av eksponering ga en vekstøkning på 111%, mot 70% hos U251. Hoechst-farging for apoptose viste at BV gir en doseavhengig induksjon av apoptose hos U251. Apoptose var også tilstede hos C6, men det er usikkert i hvilken grad BV induserer denne effekten, og om den er doseavhengig. Denne studien er den første som viser at BV gir induksjon av apoptose hos U251-celler in vitro. Resultatene viser også tydelig at forskjellige typer glioblastoma-celler reagerer i ulik grad på eksponering med BV. C6-cellene viste en gjennomgående høyere toleranse for BV sett i forhold til U251-cellene. Mekanismen for den observerte vekstreduksjonen er ikke kjent, men andre studier antyder at både calmodulin- og COX-2-hemmende effekt kan være medvirkende. Årsken til den observerte forskjellen i respons er heller ikke kjent, men en grunn kan være at de to celletypene har opphav fra forskjellige arter.
Utgiver
The University of BergenOpphavsrett
Copyright the author. All rights reservedThe author