Vis enkel innførsel

dc.contributor.authorNohre, Marie
dc.date.accessioned2016-08-17T14:25:57Z
dc.date.available2016-08-17T14:25:57Z
dc.date.issued2016-06-01
dc.date.submitted2016-06-01eng
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/1956/12621
dc.description.abstractMarine arter og økosystemer blir utsatt for menneskeskapte stoffer fra en rekke ulike kilder. Siden de biologiske effektene for mange av disse stoffene ikke er godt karakterisert er det derfor behov for gode og effektive metoder for å studere effektene av nye, kjente og også blandinger av disse forbindelsene. Atlanterhavstorsken (Gadus morhua) er en økonomisk og økologisk svært viktig art i Nord- Atlanteren. Torskegenomet ble i 2011 sekvensert og annotert (Star et al., 2011) og atlanterhavstorsken er slik en viktig modellorganisme for økotoksikologiske studier. I tråd med 3R-prinsippet (Russell og Burch, 1959) ble det nylig utviklet en metode for å tillage presisjonskuttede leverskiver (PCLS) på torsk (Eide et al., 2014). Dette er ett in vitro system som muliggjør eksponeringsforsøk for ulike miljøgifter og også blandinger av slike. Målet for denne oppgaven har vært å utvikle en prosedyre for in situ hybridisering (ISH) på PCLS og studere den cellulære lokalisasjonen av cytokrom P450 1A (CYP1A) ved eksponering for β-naftoflavon (BNF). Oppgaven viser at det på grunn av torskens høye fettinnhold er nødvendig å støpe leveren inn i et hydrofobisk materiale, slik som parafin, ved kutting av snitt til histologii eller ISH analyser. ISH av cyp1a i PCLS antyder en homogen bakgrunnsuttrykning av transkriptet i ueksponert lever og en induksjon og mer heterogen uttrykning av CYP1A etter eksponering for BNF. CYP1A er en av de viktigste biomarkørene for oljerelaterte forbindelser, men denne metoden kan også benyttes til å studere tilstedeværelsen av andre transkripter og biomarkører. ISH på PCLS muliggjør deteksjon og cellulær lokalisering av RNA og DNA og er slik en god støtte til immunohistokjemi (IHC), da det ofte ikke er tigjengelig et egnet antistoff til proteinet man vil studere. Ved hjelp av det sekvenserte og annoterte torskegenomet (Star et al., 2011) og grunnleggende molekylærbiologiske metoder kan man produsere ønskede prober og gjennomføre ISH analyser på torskelever som beskrevet i denne oppgaven.en_US
dc.format.extent5812630 byteseng
dc.format.mimetypeapplication/pdfeng
dc.language.isonobeng
dc.publisherThe University of Bergenen_US
dc.subjectGadus morhuaeng
dc.subjectcyp1aeng
dc.subjectISHeng
dc.subjectin situ hybridiseringeng
dc.subjectcytokrom p450 1aeng
dc.subjectpresisjonskuttede leverskivereng
dc.subjectPCLSeng
dc.subjectbeta-naftoflavoneeng
dc.subjectBNFeng
dc.titleIn situ hybridisering for deteksjon av cytokrom P450 1A i presisjonskuttede leverskiver (PCLS) fra atlanterhavstorsk (Gadus morhua)en_US
dc.typeMaster thesis
dc.rights.holderCopyright the Author. All rights reserveden_US
dc.description.degreeMaster i Biologien_US
dc.description.localcodeMAMN-BIO
dc.description.localcodeBIO399K
dc.subject.nus751999eng
fs.subjectcodeBIO399K


Tilhørende fil(er)

Thumbnail

Denne innførselen finnes i følgende samling(er)

Vis enkel innførsel