Vekstfaktorer frigitt fra mesenchymale stamceller og sårtilheling

Abstract

Background: In light of current research, it may seem that the biggest part of stem cells effect on wound healing is because of the growth factors the stem cells secretes. The mechanisms and effects conditioned medium from mesenchymal stem cells (MSC) have on wound healing are extensively studied on bone marrow derived MSC. More studies on this area are necessary to get a greater understanding of the effect of growth factor from MSC from different sources. Aim: This study was aimed to compare the effect of conditioned medium from MSC from bone marrow (hBMSC-CM) or adipose tissue (hAMSC-CM) from the same donor on wound healing in a damaged bone cell layer. Material and methods: An experimental in vitro design for scratch-wound assay was used to study the aim. A cell layer with osteosarcoma cell line (Saos-2) was scraped with a sterile pipette which resulted in an area without cells. Furthermore, we observed this area to see if the cells migrated into the field and thus closed the wound after adding conditioned medium from MSC with different sources compared to a positive control. Results: In this experiment we found that there was a significant closure of the scratch-wound area in the Saos-2 cells that were in the positive control. There was a small tendency for closure of the scracth-wound with hBMSC-CM and a slightly bigger closure with the scratch-wound with hAMSC-CM. The difference in closure between hBMSC-CM and hAMSC-CM was significant at 12 hours, and in the graph we can se a general tendency which implies that the scratches with hAMSC-CM have closed more than the scratches with hBMSC-CM. Conclusion: Conditioned medium collected from hAD-MSC has a superior effect on wound healing compared to the condition medium collected from hBM-MSC.

Bakgrunn: Aktuell forskning har antydet at den største delen av stamcellers effekt på sårtilheling kan skyldes utskillelsen av vekstfaktorer. Mekanismene og effekten som kondisjonert medium fra Mesenchymale stamceller (MSC) har på sårtilheling er grundig studert hos de beinmargsderiverte MSC. Flere studier er nødvendige på dette området for å kunne få en større forståelse av effekten av vekstfaktorer fra MSC fra forskjellige kilder. Mål: I dette forsøket ville vi sammenligne effekten av kondisjonert medium (CM) med humane MSC fra beinmarg (hBMSC-CM) og fra fettvev (hAMSC-CM) på sårtilheling av et beincellelag der det ble påført en skade. Material og metode: Et in vitro eksperiment ble designet som et scratch-wound assay for å undersøke om hBMSC-CM og hAMSC-CM fra samme donor ga ulik effekt på sårtilheling. Et cellelag med en osteosarkom cellelinje (Saos-2) ble skrapt med en steril pipette slik at det resulterte i et sår, eller et område uten celler. Videre observerte vi området for å se om cellene migrerte inn i området uten celler slik at såret lukket seg. Det ble tilsatt kondisjonert medium fra hMSC fra fett og beinmarg, og disse ble sammenlignet med en positiv kontroll. Resultat: Vi fant en tydelig lukking av skrapet laget i Saos-2-cellene som var tilsatt positiv kontroll. Det var en liten tendens til lukking av skrapene med hBMSC-CM og en større lukking av skrapene tilsatt hAMSC-CM. Forskjellen mellom lukkingsgrad av hBMSC-CM og hAMSC-CM var signifikant ved 12 timer, og på grafen ser vi en generell tendens som antyder at skrapene med hAMSC-CM har lukket seg noe mer enn hBMSC-CM. Konklusjon: Kondisjonert medium samlet fra hAD-MSC har en økt effect på sårtilheling sammenlignet med kondisjonert medium samlet fra hBM-MSC.